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Tests sur sang total - Exemples d'essais
1.
Le composé A est connu pour inhiber la sécrétion de TNF induite par la stimulation avec du lipopolysaccharide (LPS). Les concentrations inhibitrices à 50% vont être mesurées dans un essai sur sang total pour détecter des variations individuelles.
Principe de l’essai
Le sang total frais de 8 donneurs différents est pré-incubé avec des concentrations croissantes du composé A et traité ou pas avec du LPS. Après 4 heures d’incubation, le TNF est dosé dans les surnageants
Conclusion
Le composé A inhibe la sécrétion de TNF induite par le LPS chez tous les donneurs testés. La concentration inhibitrice à 50% varie de 1.5 à 10µM.
2.
DÉTECTION DE CONTAMINANTS
Le protocole de purification du composé B nécessite plusieurs étapes de décontamination pour éliminer des contaminants pyrogènes d’origine bactérienne. Un essai sur sang total est utilisé pour valider l’élimination des contaminants après chaque étape.
Principe de l’essai
Le sang total de 2 donneurs est incubé avec des dilutions en série du composé B prélevé après chaque étape de purification. Après 4 heures d’incubation, l’IL6 est dosée dans les surnagenants.
Conclusion
Le produit final ne contient pas de contaminants.
3.
COMPARAISON DE DIFFÉRENTES FORMULATIONS D’UN ADJUVANT
Une société développant des vaccins souhaite évaluer différentes formulations d’un adjuvant.
Principe de l’essai
Le sang total frais de 3 donneurs différents est incubé 4 à 6 heures avec des dilutions en série des formulations d’adjuvant à tester. La sécrétion de cytokines pro-inflammatoires (par exemple l’IL1, IL6 ou TNF) est alors mesurée.
Conclusion
> La formulation 1 n’induit aucune réponse chez les donneurs testés.
> La formulation 3 est aussi efficace que le contrôle positif.
> La formulation 4 est moins efficace que la formulation 3
> Il est intéressant de noter que la formulation 2 fonctionne chez les donneurs A et C mais pas avec le donneur B mettant ainsi en évidence des variations individuelles spécifiques à cette formulation.